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具有漂白催化劑和吉氏芽孢桿菌蛋白酶的餐具清洗劑的制作方法

文檔序號:29064580發布日期:2022-03-01 17:12
具有漂白催化劑和吉氏芽孢桿菌蛋白酶的餐具清洗劑的制作方法
具有漂白催化劑和吉氏芽孢桿菌蛋白酶的餐具清洗劑
1.本發明涉及含有漂白劑的餐具清洗劑,其包含至少一種吉氏芽孢桿菌(bacillus gibsonii)蛋白酶。本文所述的相應清潔方法和試劑的使用也是本發明的部分。
2.酶在清洗劑和清潔劑中的使用在現有技術中已確立了數十年。它們根據其特殊活性作用于擴展所討論的試劑的性能范圍。這些特別包括水解酶,例如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和纖維素酶。所提到的前三種酶水解蛋白質、淀粉和脂肪,并且因此直接促成污垢的去除。特別使用纖維素酶是由于其組織效應。蛋白酶是用于實際上所有現代有效清洗劑和清潔劑的歷史最悠久的酶。這使得其成為所有技術上最重要的酶之一。其中,依次地,枯草桿菌蛋白酶類型的蛋白酶(枯草桿菌酶、枯草桿菌肽酶,ec 3.4.21.62)是特別重要的,并且由于催化活性的氨基酸而是絲氨酸蛋白酶。它們充當非特異性內肽酶,并且水解肽或蛋白質內部的任何酸酰胺鍵。它們的最佳ph通常在明顯的堿性范圍內。例如,在r.siezen的論文"subtilases:subtilisin-like proteases",r.bott和c.betzel發表的"subtilisin enzymes,new york,1996"中的第75-95頁中給出了此家族的概述??莶輻U菌酶天然地由微生物形成。特別地,通過芽孢桿菌屬(bacillus)物種形成且分泌的枯草桿菌蛋白酶是最重要的枯草桿菌酶組。在清洗劑和清潔劑中,蛋白酶用于分解待清潔物品上的含蛋白質污漬。
3.餐具清洗劑對于消費者以多種產品形式可獲得。除傳統的液體手洗餐具清洗劑之外,隨著家用洗碗機的普及,自動餐具清洗劑已特別地得到了極大的重視。這些自動餐具清洗劑通常以固體形式,例如作為粉末或片劑供應給消費者。
4.自動清潔劑的制造商的主要目標之一是改善這些清潔劑的清潔性能,其中最近關注的是在低溫清潔過程中或在伴隨減少的水消耗的清潔過程中的清潔性能。
5.然而,含蛋白質污漬,尤其是蛋漬,和可漂白污漬,尤其是茶漬,代表了經常不能令人滿意地去除的頑固污漬?,F代餐具清洗劑,特別是自動餐具清洗劑,經常不能滿足關于去除此類污漬的要求。因此,仍然需要特別是即使在較低的清潔溫度下,也可靠地去除含蛋白質污漬和可漂白污漬的餐具清洗劑,特別包括自動餐具清洗劑。
6.在這方面,歐洲專利申請ep0846155公開了脂肪酶的添加增加了漂白劑對茶漬的作用。氨基酸作為漂白穩定劑的用途出現于歐洲專利申請ep0476257。
7.本發明的目的是進一步改善餐具清洗劑的清潔性能,特別是對含蛋白質污漬和/或可漂白污漬,特別是茶漬的清潔性能。
8.一般而言,在任何情況下,僅所選的蛋白酶適用于含表面活性劑的液體制劑。許多蛋白酶在此類制劑中并未顯示出足夠的催化性能。因此,對于蛋白酶在清潔劑中的使用,當它們在洗滌循環期間的條件下的高催化活性和穩定性是特別期望的。
9.因此,在第一個方面,本發明的目的是包含過氧化氫源、漂白催化劑和吉氏芽孢桿菌蛋白酶的餐具清洗劑,所述吉氏芽孢桿菌蛋白酶包含的氨基酸序列在其整個長度上與seq id no:1中給出的氨基酸序列具有至少70%的序列相同性,并且在對應于在每種情況下都與根據seq id no:1的編號有關的位置12、43、122、127、154、156、160、211、212和222的至少一個位置上具有氨基酸取代。
10.本發明的一個進一步目的是包含過氧化氫源、漂白催化劑和吉氏芽孢桿菌蛋白酶
的餐具清洗劑,所述吉氏芽孢桿菌蛋白酶在其整個長度上與seq id no:1中給出的氨基酸序列具有至少70%的序列相同性,并且在對應于在每種情況下基于根據seq id no:1的編號的位置12、43、122、127、154、156、160、211、212和222的至少一個位置上具有氨基酸取代q12l、i43v、m122l、d127p、n154s、t156a、g160s、m211n、m211l、p212d、p212h或a222s中的至少一種。
11.本發明的另一個目的是用于生產此類餐具清洗劑的方法,以及用于去除硬表面,特別是餐具上的含蛋白質污漬,特別是蛋漬,和/或可漂白污漬,特別是茶漬的方法。
12.本發明的另一個目的是此類餐具清洗劑用于清潔硬表面,特別是餐具,特別是用于去除含蛋白質污漬,特別是蛋漬,和/或可漂白污漬,特別是茶漬的用途。
13.通過研究下述詳細描述和權利要求,本發明的這些和其它方面、特征和優點對于本領域技術人員將變得顯而易見。來自本發明的一個方面的任何特征均可以用于本發明的任何其它方面。此外,容易理解的是,在本文中含有的實例預期描述且說明而非限制本發明,并且特別地,本發明并不限于這些實例。
14.除非另有說明,否則所有百分比都按照wt.%進行指示。以格式“從x到y”指示的數值范圍也包括所陳述的值。如果以這種格式指示了幾個優選的數值范圍,則容易理解的是,還包括起因于各種端點的組合的所有范圍。如本文使用的,“至少一個/種”意指一個/種或更多個/種,即1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14個/種或更多個/種。如本文使用的,“餐具清洗劑”與術語“清潔劑”或“試劑”同義,并且表示用于清潔硬表面,特別是餐具的組合物,如說明書中解釋的。如本文使用的,與數值有關的“約”、“大約(ca.)”或“大約”涉及相應數值
±
10%,優選
±
5%。
15.本發明基于本發明人的以下驚人發現:包含蛋白酶的餐具清洗劑不僅對含蛋白質污漬,特別是蛋漬具有改善的清潔性能,而且與漂白催化劑組合,具有非常好的漂白性能,并且因而顯示了對可漂白污漬,特別是茶漬非常好的清潔性能,所述蛋白酶包含的這樣氨基酸序列,其在其整個長度上與seq id no:1中給出的氨基酸序列具有至少70%的序列相同性,并且在對應于各自基于根據seq id no:1的編號的位置12、43、122、127、154、156、160、211、212和222的至少一個位置上具有至少一個氨基酸取代。
16.這是特別令人驚訝的,因為迄今為止此類吉氏芽孢桿菌蛋白酶與餐具清洗劑的清潔性能改善并不相關,特別是與含蛋白質污漬和可漂白污漬無關。特別地,對可漂白污漬的非常好的清潔性能是驚人的,因為蛋白酶一般對清洗劑和清潔劑中的漂白劑敏感,并且在漂白劑的存在下無法良好地工作。根據本發明的蛋白酶看起來不僅對清潔劑中的漂白劑較不敏感,并且因此顯示了對含蛋白質污漬通常改善的清潔性能,而且在根據本發明的試劑(mittel)的優選實施方案中,在相應的蛋白酶和漂白催化劑之間還存在關于清潔性能,特別是關于對茶漬的清潔性能的協同作用。
17.根據本發明的試劑的進一步優選實施方案即使在低溫下和/或用短洗滌循環也顯示了此類有利的清潔性能。在本發明的含義內的低溫優選為10至50℃,優選為15至45℃并且特別優選為20至40℃。短洗滌循環優選持續最多60分鐘、45分鐘或最多僅30分鐘。根據本發明的試劑的進一步優選實施方案還顯示了改善的最終漂洗性能。
18.清潔性能描述了餐具清洗劑,特別是自動餐具洗滌清洗劑,部分或完全去除現有污漬的能力。在本發明的范圍內,包含蛋白酶或由該試劑形成的清潔液的餐具清洗劑和蛋
白酶本身均具有分別的清潔性能。因此,酶的清潔性能對試劑或由試劑形成的清潔液的清潔性能做出貢獻。
19.清潔液應理解為意指使含有餐具清洗劑的用溶液,其作用于硬表面并因此與硬表面上存在的污漬接觸。清潔液通常在清潔過程開始時產生,并且餐具清洗劑例如在洗碗機或其它合適的容器中用水稀釋。
20.清潔性能可以在含有以如本文指定劑量的自動餐具清洗劑和蛋白酶的系統中進行確定,其中待比較的蛋白酶以相同濃度(基于活性蛋白質)使用,并且根據miele gsl(程序45℃,21
°
dh)中的ikw方法,確定針對茶、肉、意大利面、蛋和/或焦糖布蕾的污漬的清潔性能?;诨钚?、純化的蛋白質,預期用于這種洗滌系統的清洗劑中的蛋白酶濃度為0.001至0.1wt.%,優選為0.01至0.06wt.%。
21.用于此類洗滌系統的參考試劑可以如下組成:
[0022][0023]
有關蛋白酶的活性等價使用確保了,即使活性物質/總蛋白質的比率(比活性的值)分散,也可以比較分別的酶促性質,例如對某些污漬的清潔性能。一般而言,低比活性可以通過添加更大量的蛋白質得到補償。此外,如果待檢查的酶在活性測試中對于測試底物具有不同的親和力,則待檢查的酶也可以以相同的物質量或按重量計的量使用。在此上下文中,表述“相同的物質量”涉及待調查的酶的摩爾用量。術語“相等重量”涉及待調查的酶
的相同重量的使用。
[0024]
在其它方面,用于確定蛋白酶活性的方法是酶技術領域的技術人員眾所周知,并且由酶技術領域的技術人員常規使用的。例如,此類方法公開于tenside,第7卷(1970),第125-132頁中。蛋白酶活性通常以蛋白酶單位(pu)指示。合適的蛋白酶活性是例如每ml洗滌液或洗滌過程2.25、5或10pu。然而,蛋白酶活性并不等于零。
[0025]
可以使用已知方法確定蛋白質濃度,所述方法例如bca法(二辛可寧酸;2,2'-二喹啉基-4,4'-二羧酸)或雙縮脲法(gornall等人,1948,j.biol.chem.,177:751-766)。在這方面,可以通過使用合適的不可逆抑制劑滴定活性中心并確定殘留活性,來確定活性蛋白質濃度(參照m.bender等人,1966,j.am.chem.soc.88(24):5890-5913)。
[0026]
根據本發明的蛋白酶特別是在清洗劑或清潔劑中顯示出酶促活性,即它們能夠水解肽和蛋白質。因此,根據本發明的蛋白酶是催化蛋白質/肽底物中的酰胺鍵/肽鍵水解并因此能夠切割蛋白質或肽的酶。此外,根據本發明的蛋白酶優選是成熟蛋白酶,即沒有信號肽和/或前肽的催化活性分子。除非另有說明,否則給出的序列也各自指成熟(加工的)酶。
[0027]
在本發明的各個實施方案中,蛋白酶是游離酶。這意指蛋白酶可以直接與試劑的所有組分一起作用,并且如果試劑是液體試劑,則蛋白酶與試劑的溶劑(例如水)直接接觸。在其它實施方案中,試劑可以含有與其它分子形成相互作用復合物或含有“包衣”的蛋白酶。在這種情況下,個別蛋白酶分子或多重蛋白酶分子可以通過周圍結構與試劑的其它組成成分分開。此類分離結構可以起于但不限于囊泡如膠束或脂質體。周圍結構也可以是病毒顆粒、細菌細胞或真核細胞。在各個實施方案中,試劑可以包括表達根據本發明的蛋白酶的吉氏芽孢桿菌或枯草芽孢桿菌(bacillus subtilis)的細胞、或者此類細胞的細胞培養上清液。
[0028]
令人驚訝地,正是在根據本發明的餐具清洗劑中的那些蛋白酶一方面改善對含蛋白質污漬,特別是蛋漬的清潔性能,并且另一方面,在與根據本發明的試劑中的漂白催化劑的相互作用中,帶來對可漂白污漬,特別是茶漬的改善的清潔性能,所述蛋白酶包含這樣的氨基酸序列,其在其整個長度上與seq id no:1中給出的氨基酸序列具有至少70%的序列相同性,并且在對應于各自基于根據seq id no:1的編號的位置12、43、122、127、154、156、160、211、212和222的至少一個位置上具有氨基酸取代。在這方面,優選存在協同相互作用。
[0029]
此外,在各個實施方案中,根據本發明使用的吉氏芽孢桿菌蛋白酶含有選自以下的至少一個氨基酸取代:q12l、i43v、m122l、d127p、n154s、t156a、g160s、m211n、m211l、p212d、p212h,在每種情況下基于根據seq id no:1的編號。
[0030]
在進一步優選的實施方案中,根據本發明使用的蛋白酶含有下述氨基酸取代變體之一:(i)i43v;(ii)m122l、n154s和t156a;(iii)m211n和p212d;(iv)m211l和p212d;(v)g160s;(vi)d127p、m211l和p212d;(vii)p212h;或(viii)q12l、m122l和a222s,其中每種情況下的編號基于根據seq id no:1的編號。
[0031]
在本發明的進一步實施方案中,根據本發明使用的蛋白酶包含這樣的氨基酸序列,其在其整個長度上優選與seq id no:1中給出的氨基酸序列至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、90.5%、91%、91.5%、92%、92.5%、93%、93.5%、94%、94.5%、95%、95.5%、96%、96.5%、97%、97.5%、98%、98.5%和98.8%相同,并且在每種情況下基于根
據seq id no:1的編號包含(a)對應于根據seq id no:1的編號中的位置12、43、122、127、154、156、160、211、212或222的一種或多種氨基酸取代12l、43v、122l、127p、154s、156a、160s、211n、211l、212d、212h或222s。
[0032]
在本發明的上下文中,由此蛋白酶包含所述取代的特征意指它含有在相應位置中的至少一種相應氨基酸,即并非所有10個位置都以其它方式例如通過蛋白酶的片段化而突變或缺失。
[0033]
核酸序列或氨基酸序列的相同性通過序列比較進行確定。該序列比較基于現有技術中建立且常用的blast算法(參照例如,altschul等人(1990)“basic local alignment search tool,”j.mol.biol.215:403-410,以及altschul等人(1997):“gapped blast and psi-blast:a new generation of protein database search programs,”nucleic acids res.,25:3389-3402),并且原則上通過彼此分配的核酸序列或氨基酸序列中的核苷酸或氨基酸的類似序列而發生。表中所示的有關位置的分配被稱為比對?,F有技術中可用的另一種算法是fasta算法。使用計算機程序創建序列比較(比對),特別是多重序列比較。例如,clustal系列(參照例如,chenna等人(2003)“multiple sequence alignment with the clustal series of programs,”nucleic acid res.31:3497-3500)、t-coffee(參照例如,notredame等人(2000)“t-coffee:a novel method for multiple sequence alignments,”j.mol.biol.302:205-217)或者基于這些程序或算法的程序是頻繁使用的。使用計算機程序vectorsuite 10.3(invitrogen corporation,1600 faraday avenue,carlsbad,kalifornien,usa)與預定的默認參數的序列比較(比對),以及其序列比較基于clustalw的alignx模塊也是可能的。除非另有說明,否則本文給出的序列相同性通過blast算法進行確定。
[0034]
此類比較還允許得出關于所比較序列的相似性的結論。它通常以相同性百分比給出,即在所述序列中或在相應位置的比對中的相同核苷酸或氨基酸原子團的比例。更廣泛的同源性概念在氨基酸序列的情況下考慮了保守的氨基酸交換,即具有相似化學活性的氨基酸,因為它們通常在蛋白質內進行相似的化學活性。因此,所比較序列的相似性也可以陳述為同源性百分比或相似性百分比??梢蕴峁╆P于整個多肽或基因或者僅關于各個區域的相同性和/或同源性信息。因此,不同核酸或氨基酸序列的同源或相同區域由序列中的匹配來定義。此類區域經常包含相同的功能。它們可以很小并且僅包含幾個核苷酸或氨基酸。經常地,此類小區域進行對于蛋白質的總體活性必需的功能。因此,將序列匹配僅與個別的、任選地小區域相關聯可能是有利的。然而,除非另有說明,否則本技術中的相同性或同源性信息涉及所指示的特定核酸序列或氨基酸序列的整個長度。在本發明的上下文中,氨基酸位置對應于seq id no:1中的數字指定位置的指示因此意指,在如上文定義的比對中,相應位置與seq id no:1中的數字指定位置相關。
[0035]
本發明的一個進一步目的是具有蛋白酶的清潔劑,其特征在于所述蛋白酶可以通過一種或多種保守氨基酸取代,從作為起始分子的根據本發明的蛋白酶獲得。術語“保守氨基酸取代”意指一個氨基酸原子團與另一個氨基酸原子團的交換(取代),其中這種交換并不導致在所交換氨基酸的位置處的極性或電荷變化,例如一個非極性氨基酸原子團與另一個非極性氨基酸原子團的交換。在本發明的范圍內的保守氨基酸取代包括例如:g=a=s、i=v=l=m、d=e、n=q、k=r、y=f、s=t、g=a=i=v=l=m=y=f=w=p=s=t。
[0036]
本發明的另一個目的是具有蛋白酶的清潔劑,其特征在于所述蛋白酶可以通過片段化、缺失、插入或取代誘變,從作為起始分子的根據本發明的蛋白酶獲得,并且包含在至少50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、261、262、263、264、265、266、267、268或269個鄰接氨基酸的長度上匹配起始分子的氨基酸序列。
[0037]
例如,能夠在酶的末端處或環中缺失個別氨基酸,而蛋白酶解活性在該過程中并不喪失或減弱。此外,此類片段化或缺失、插入或取代誘變也可以例如降低所涉及的酶的變應原性,并且因此改善其整體適用性。即使在誘變之后,酶也有利地保留其蛋白酶解活性,即它們的蛋白酶解活性至少對應于起始酶的蛋白酶解活性。其它取代也可以顯示出有利的效應。單個和多重鄰接氨基酸均可以與其它氨基酸交換。
[0038]
根據本發明的蛋白酶可以另外特別地通過一個或多個突變,例如取代,或通過與聚合物偶聯而得到穩定。在貯存期間和/或在使用期間例如在洗滌過程中的穩定性增加,導致更長的酶促活性并因此改善清潔性能。原則上,考慮了現有技術中描述的和/或適當的所有穩定化選項。通過酶本身的突變實現的那些穩定化是優選的,因為此類穩定化在酶回收之后并不需要任何進一步的工作步驟。用于穩定化的進一步可能性是例如:
[0039]-例如通過將涉及鈣結合的一種或多種氨基酸與一種或多種帶負電荷的氨基酸交換,和/或通過在兩種氨基酸精氨酸和甘氨酸的至少一種序列中引入序列改變,改變金屬離子的結合,特別是鈣結合位點;
[0040]-通過引起在蛋白質的表面上或在蛋白質的表面處的氨基酸序列改變的突變,來保護免于更多變性劑如表面活性劑的影響;
[0041]-將靠近n末端的氨基酸與很可能經由非共價相互作用接觸分子的剩余部分的那些氨基酸交換,因此促成球狀結構的維持。
[0042]
優選的實施方案是其中酶以幾種方式得到穩定的那些實施方案,因為幾種穩定突變相加地或協同地起作用。
[0043]
本發明還涉及如上所述的蛋白酶,其特征在于它具有至少一種化學修飾。具有此類改變的蛋白酶被稱為衍生物,即蛋白酶被衍生化。在本技術的上下文中,衍生物因此應理解為意指其純氨基酸鏈已進行化學修飾的那些蛋白質。此類衍生化可以例如通過表達蛋白質的宿主細胞在體內實現。在這方面,低分子量化合物如脂質或寡糖的偶聯特別值得注意。然而,衍生化也可以例如通過氨基酸側鏈的化學轉換、或通過另一種化合物與蛋白質的共價鍵合在體外進行。例如,能夠將胺與酶的羧基偶聯,以便改變等電點。例如,另一種此類化合物也可以是另一種蛋白質,其經由雙功能化學化合物與根據本發明的蛋白質結合。衍生化也應理解為意指與大分子載體的共價鍵合或合適的大分子籠形結構中的非共價包含。例如,衍生化可能影響底物特異性或與底物的結合強度,或者當偶聯的物質是抑制劑時,引起酶促活性的暫時阻斷。例如,對于貯存期間,這可能是有利的。此類修飾可能進一步影響穩定性或酶促活性。它們還可以用于降低蛋白質的變應原性和/或免疫原性,并且因此例如增加其皮膚相容性。例如,與大分子化合物例如聚乙二醇的偶聯可以在穩定性和/或皮膚相容性方面改善蛋白質。根據本發明的蛋白質的衍生物也可以在最廣泛的含義上理解為意指這些蛋白質的制劑。取決于回收、加工或制備,蛋白質可以與各種其它物質進行交聯,所述各種其它物質例如來自生產微生物的培養物。蛋白質也可能已有意地加入其它物質中,例如
以增加其貯存穩定性。因此,根據本發明的蛋白質的所有制劑也符合本發明。這也與它是否在特定制劑中實際上顯示出這種酶促活性無關。這是因為可能期望它在貯存期間沒有活性或僅具有低活性,并且僅在使用時顯示出其酶促功能。例如,這可以經由適當的伴隨物質加以控制。
[0044]
眾多蛋白酶,且特別是枯草桿菌蛋白酶形成為所謂的前蛋白,即連同前肽和信號肽一起形成,其中信號肽的功能通常是確保蛋白酶從產生其的細胞釋放到周質或細胞周圍的培養基內,而前肽通常是蛋白酶正確折疊所必需的。信號肽和前肽通常是前蛋白的n末端部分。信號肽在天然條件下通過信號肽酶與蛋白酶的剩余部分分離。然后發生由前肽支持的蛋白酶的正確最終折疊。然后蛋白酶處于其活性形式并切割前肽本身。在前肽已分離后,當時成熟的蛋白酶,特別是枯草桿菌蛋白酶,無需最初存在的n末端氨基酸而發揮其催化活性。對于一般而言且特別是在本發明的范圍內的技術應用,成熟蛋白酶,即在其生產后進行加工的酶,優選于前蛋白。蛋白酶也可以在多肽鏈產生后通過產生其的細胞進行修飾,例如通過附著糖分子、甲?;?、胺化等。此類修飾是翻譯后修飾,并且可以但不必具有對蛋白酶功能的影響。
[0045]
如本文使用的,“變體”涉及天然蛋白酶的天然或人工生成的變體,其具有從參考形式進行修飾的氨基酸序列。除上文討論的氨基酸改變之外,根據本發明的蛋白酶還可以具有其它氨基酸改變,特別是氨基酸取代、插入或缺失。此類蛋白酶例如通過靶向遺傳改變,即通過誘變方法進行開發,并且對于特定應用或關于特定性質(例如關于其催化活性、穩定性等)進行優化。此外,根據本發明的核酸可以引入重組方法內,并且因此可以用于生成全新類型的蛋白酶或其它多肽。目的是將靶向突變例如取代、插入或缺失引入已知分子內,以便例如改善酶的清潔性能。為此目的,特別地可以改變分子的表面電荷和/或等電點,并且因此改變其與底物的相互作用。例如,特別是對于在清洗劑和清潔劑中的使用,可以改變酶的凈電荷,以便影響底物結合??商娲鼗蛄硗?,一種或多種相應的突變可以增加酶的穩定性或催化活性,并且因此改善其清潔性能。個別突變例如個別取代的有利性質可以相互補充。因此可以在本發明的范圍內進一步開發這樣的蛋白酶,其已經關于某些性質,例如關于其針對表面活性劑和/或漂白劑和/或其它組分的穩定性進行優化。
[0046]
關于與恰好一個氨基酸位置有關的取代(氨基酸交換)的描述,在本文中使用下述約定:首先,以國際上使用的單字母代碼的形式指定天然存在的氨基酸,隨后為相關的序列位置,且最后為所插入的氨基酸。同一多肽鏈內的幾個交換通過斜線分開。對于插入,另外的氨基酸遵循序列位置命名。在缺失的情況下,缺少的氨基酸由符號例如星號或破折號替換,或者在相應位置之前指示δ。例如,p14h描述了在位置14處的脯氨酸由組氨酸的取代,p14ht描述了在位置14處的氨基酸組氨酸之后的蘇氨酸插入,并且p14*或δp14描述了在位置14處的脯氨酸缺失。該命名法是酶技術領域的技術人員已知的。
[0047]
在這種情況下,通過根據本發明的蛋白酶的氨基酸序列與如seq id no:1中給出的、來自吉氏芽孢桿菌的蛋白酶的氨基酸序列的比對,來限定氨基酸位置。此外,位置的分配取決于成熟蛋白質。如果與根據seq id no:1的來自吉氏芽孢桿菌的蛋白酶相比,根據本發明的蛋白酶的氨基酸序列包含更多數目的氨基酸原子團,則特別地也使用這種分配。從來自吉氏芽孢桿菌的蛋白酶的氨基酸序列中的上述位置進行,根據本發明使用的蛋白酶中的改變位置是在比對中精確地分配給這些位置的那些位置。
[0048]
在本發明的一個進一步實施方案中,蛋白酶的特征在于,與包含的氨基酸序列對應于seq id no:1中給出的氨基酸序列的蛋白酶相比,其清潔性能沒有顯著降低,即具有至少80%的參考洗滌性能,優選至少100%,更優選至少110%或更多。清潔性能可以如上所述進行確定。
[0049]
基于蛋白酶的活性蛋白質含量,根據本發明的餐具清洗劑越來越優選地含有其量為1
×
10-8
至10wt.%、0.00001至2wt.%、0.001至1wt.%、0.007至0.8wt.%、0.025至0.5wt.%,且特別優選0.04至0.38wt.%的蛋白酶。
[0050]
根據本發明的餐具清洗劑還包含漂白活化劑。這些物質優選為強化漂白的過渡金屬鹽或過渡金屬絡合物,例如mn-、fe-、co-、ru-或mo-salen絡合物或羰基絡合物。具有含n三腳架配體的mn-、fe-、co-、ru-、mo-、ti-、v-和cu-絡合物,以及co-、fe-、cu-和ru-氨絡合物也可以用作漂白催化劑。
[0051]
特別優選使用處于氧化階段ii、iii、iv或iv的錳的絡合物,其優選含有具有供體功能n、nr、pr、o和/或s的一種或多種大環配體。優選地,使用具有氮供體功能的配體。特別優選在根據本發明的試劑中使用漂白催化劑,其含有作為大分子配體的1,4,7-三甲基-1,4,7-三氮雜環壬烷(me-tacn)、1,4,7-三氮雜環壬烷(tacn)、1,5,9-三甲基-1,5,9-三氮雜環十二烷(me-tacd)、2-甲基-1,4,7-三甲基-1,4,7-三氮雜環壬烷(me/me-tacn)和/或2-甲基-1,4,7-三氮雜環壬烷(me/tacn)。合適的錳絡合物是例如[mn
iii2
(μ-o)1(μ-oac)2(tacn)2](clo4)2、[mn
iii
mn
iv
(μ-o)2(μ-oac)1(tacn)2](bph4)2、[mn
iv4
(μ-o)6(tacn)4](clo4)4、[mn
iii2
(μ-o)1(μ-oac)2(me-tacn)2](clo4)2、[mn
iii
mn
iv
(μ-o)1(μ-oac)2(me-tacn)2](clo4)3、[mn
iv2
(μ-o)3(me-tacn)2](pf6)2和[mn
iv2
(μ-o)3(me/me-tacn)2](pf6)2(oac=oc(o)ch3)。
[0052]
其特征在于它們含有選自強化漂白的過渡金屬鹽和過渡金屬絡合物的漂白催化劑,優選選自錳與1,4,7-三甲基-1,4,7-三氮雜環壬烷(me-tacn)或1,2,4,7-四甲基-1,4,7-三氮雜環壬烷(me/me-tacn)的絡合物的餐具清洗劑,特別是自動餐具清洗劑,根據本發明是優選的,因為上述漂白催化劑可以特別顯著地改善清潔結果。
[0053]
特別是具有中心原子mn和co的上述強化漂白的過渡金屬絡合物,優選以至多5wt.%,特別是0.0025至1wt.%,且特別優選0.01至0.30wt.%的量使用,在每種情況下基于含有漂白劑催化劑的組合物的總重量。然而,在特殊情況下,也可以使用更多的漂白催化劑。
[0054]
根據本發明的餐具清洗劑進一步包含過氧化氫源。這些是在水中傳遞或可以傳遞h2o2的化合物。過氧化氫源優選為漂白劑,其中氧漂白劑根據本發明是優選的。
[0055]
在充當漂白劑并在水中產生h2o2的化合物組中,過碳酸鈉、四水合過硼酸鈉和一水合過硼酸鈉具有特別的重要性??梢允褂玫钠讋┑倪M一步實例是過氧焦磷酸鹽、檸檬酸過氧化氫合物以及產生h2o2的過酸鹽或過酸,例如過氧化苯甲酸鹽、過氧化鄰苯二甲酸鹽、雙過壬酸酞亞氨過酸或雙過十二烷二酸
[0056]
此外,也可以使用來自有機漂白劑的組的漂白劑。通常的有機漂白劑是二?;^氧化物,例如過氧化二苯甲酰。其它通常的有機漂白劑是過氧酸,其中烷基過氧酸和芳基過氧酸作為實例特別值得一提。
[0057]
過氧化氫源優選以2至30wt.%,并且越來越優選地4至25wt.%、5至20wt.%且特
別優選6至15wt.%的量包含在根據本發明的餐具清洗劑中,分別基于餐具清洗劑的總重量。優選的餐具清洗劑的特征還在于,在每種情況下基于自動餐具洗滌清洗劑的總重量,餐具清洗劑含有2至20wt.%,優選3至18wt.%,且特別是4至15wt.%的過碳酸鈉。
[0058]
因而,根據本發明的餐具清洗劑的特別優選的實施方案的特征在于,所述漂白催化劑選自增強漂白的過渡金屬鹽和過渡金屬絡合物,優選選自錳與1,4,7-三甲基-1,4,7-三氮雜環壬烷(me-tacn)或1,2,4,7-四甲基-1,4,7-三氮雜環壬烷(me/me-tacn)的絡合物,和/或所述過氧化氫源是過碳酸鈉、過硼酸鈉四水合物或過硼酸鈉一水合物或它們的組合。漂白催化劑非常特別地優選是錳與1,4,7-三甲基-1,4,7-三氮雜環壬烷(me-tacn)的絡合物,特別是[mn
iv2
(μ-o)3(me-tacn)2](pf6)2、或1,2,4,7-四甲基-1,4,7-三氮雜環壬烷(me/me-tacn)或其混合物,以及過氧化氫源過碳酸鈉。漂白催化劑和過氧化氫源優選以上述量存在于所提到的組合中。
[0059]
例如,根據本發明的餐具清洗劑,特別是自動餐具清洗劑,還可以含有漂白活化劑,以便在60℃及以下的溫度下清潔時實現改善的漂白效果。在過水解條件下,導致優選具有1至10個c原子,特別是2至4個c原子的脂族過氧羧酸,和/或任選取代的過苯甲酸的化合物可以用作漂白活化劑。具有所述c原子數的o?;?或n?;?或任選取代的苯甲?;奈镔|是合適的。多?;瘉喭榛肥莾炦x的,其中四乙酰乙基乙二胺(taed)已證明是特別合適的。
[0060]
這些漂白活化劑優選以0.1至10wt.%,特別是0.1至8wt.%,尤其是2至8wt.%,且特別優選2至6wt.%的量使用,在每種情況下基于試劑的總重量。
[0061]
在本發明的一個優選實施方案中,根據本發明的餐具清洗劑是自動餐具清洗劑。依照本技術,自動餐具清洗劑是可以在自動餐具洗滌過程中用于清潔弄臟的餐具的組合物。因此,根據本發明的自動餐具清洗劑不同于自動漂洗助劑,其總是與自動餐具清洗劑組合使用并且其自身不具有任何清潔效果。
[0062]
機器洗滌的餐具經常遭受比手動洗滌的餐具更高的要求。在機器清潔后,餐具不僅應該不含食物殘渣,還應該沒有由于水的硬度或其它礦物鹽的任何發白的污漬,所述發白的污漬來自由于缺乏潤濕劑的干燥水滴?,F代機器餐具清洗劑通過整合清潔和/或維護和/或水軟化和/或漂洗活性成分來滿足這些要求,并且例如是消費者所熟知的“2合1”或“3合1”餐具清洗劑。自動餐具清洗劑含有助洗劑作為用于清潔和漂洗成功的必要組分。一方面,這些助洗劑增加了清潔液的堿度,其中脂肪和油隨著堿度增加而乳化且皂化,并且另一方面,通過絡合水溶液中含有的鈣離子,它們降低了清潔液的水硬度。
[0063]
此外,根據本發明的餐具清洗劑可以包含選自以下的至少一種進一步成分:表面活性劑、助洗劑、(陰離子)聚合物、玻璃腐蝕抑制劑、腐蝕抑制劑及它們的組合。它們還可能含有與水混溶的有機溶劑、進一步的酶、螯合劑、電解質、ph調節劑和/或進一步的助劑,例如熒光增白劑、灰化抑制劑、顏色轉移抑制劑、泡沫調節劑、以及染料和香料及它們的組合。在本發明的一個進一步實施方案中,根據本發明的餐具清洗劑是無磷的。從環境的觀點來看,根據本發明的無磷餐具清洗劑是特別有利的。
[0064]
試劑的成分優選彼此匹配。關于清潔性能和/或漂洗性能和/或沉積物抑制的協同作用是優選的。在10至100℃的溫度范圍內,特別是在15至100℃、20至70℃、20至60℃、20至50℃、20至40℃、15至30℃和15至25℃的溫度范圍內存在的協同作用是特別優選的。
[0065]
根據本發明的餐具清洗劑,特別是自動餐具清洗劑,可以含有一種或多種表面活性劑,其中陰離子型表面活性劑、非離子型表面活性劑及其混合物是特別合適的。
[0066]
在陰離子型表面活性劑中優選的是具有至少一個硫酸鹽或磺酸鹽基團的那些。具有至少一個硫酸鹽或磺酸鹽基團的陰離子型表面活性劑優選選自脂肪醇硫酸鹽、烷烴磺酸鹽和烷基苯磺酸鹽。此處優選的是c12-18脂肪醇硫酸鹽(fas),例如sulfopon k35(cognis,德國),仲c13-17烷烴磺酸鹽(sas),例如hostapur sas 93(clariant,德國),以及線性c8-18烷基苯磺酸鹽,尤其是十二烷基苯磺酸鹽(las)。根據本發明,術語“硫酸鹽”和“磺酸鹽”不僅包括以鹽的形式存在的有關陰離子化合物,還包括游離酸,即相應的烷基硫酸或烷基磺酸。根據本發明的餐具清洗劑中具有至少一個硫酸鹽或磺酸鹽基團的陰離子型表面活性劑優選以0.1至20wt.%,特別優選0.5至15wt.%,特別是2.5至10wt.%的量包含。
[0067]
非離子型表面活性劑是根據本發明的清潔劑的優選組分,其中通式r
1-ch(oh)ch2o-(ao)
w-(a'o)
x-(a”o)
y-(a'”o)
z-r2的非離子型表面活性劑是優選的,在所述通式中,r1代表直鏈或支鏈、飽和或者單不飽和或多不飽和的c
6-24-烷基或-烯基原子團;r2代表具有2至26個碳原子的線性或支鏈烴原子團;a、a’、a
”’
和a”'’彼此獨立地代表來自基團-ch2ch2、-ch2ch
2-ch2、-ch
2-ch(ch3)、-ch
2-ch
2-ch
2-ch2、-ch
2-ch(ch3)-ch
2-、-ch
2-ch(ch
2-ch3)的原子團,并且w、x、y和z代表0.5至120的值,其中x、y和/或z也可以為0。
[0068]
通過加入通式r
1-ch(oh)ch2o-(ao)
w-(a’o)
x-(a”o)
y-(a
”’
o)
z-r2的上述非離子型表面活性劑,隨后也稱為“羥基混合醚”,與不含表面活性劑的系統相比,以及與含有例如來自聚烷氧基化脂肪醇組的替代非離子型表面活性劑的系統相比,根據本發明的含酶制劑的清潔性能可以令人驚訝地得到顯著改善。
[0069]
通過使用在一個或兩個末端烷基原子團上具有一個或多個游離羥基的這些非離子型表面活性劑,可以基本上改善在根據本發明的清潔劑制劑中包含的酶的穩定性。
[0070]
特別優選的是封端的聚(氧烷基化)非離子型表面活性劑,根據式r1o[ch2ch2o]
x
ch2ch(oh)r2,除代表具有2至30個碳原子,優選具有4至22個碳原子的線性或支鏈、飽和或不飽和、脂族或芳族烴原子團的原子團r1之外,其還包含具有1至30個碳原子的線性或支鏈、飽和或不飽和、脂族或芳族烴原子團r2,其中x代表1至90的值,優選30至80的值,且特別是30至60的值。
[0071]
式r1o[ch2ch(ch3)o]
x
[ch2ch2o]ych2ch(oh)r2的表面活性劑是特別優選的,其中r1代表具有4至18個碳原子的線性或支鏈的脂族烴原子團或其混合物,r2代表具有2至26個碳原子的線性或支鏈的烴原子團或其混合物,并且x代表0.5至1.5的值,且y代表至少15的值。這些非離子型表面活性劑的組包括例如c
2-26
脂肪醇-(po)
1-(eo)
15-40-2-羥基烷基醚,還特別是c
8-10
脂肪醇-(po)
1-(eo)
22-2-羥基癸基醚。
[0072]
還特別優選的是式r1o[ch2ch2o]
x
[ch2ch(r3)o]ych2ch(oh)r2的封端的聚(氧烷基化)非離子型表面活性劑,其中r1和r2彼此獨立地代表具有2至26個碳原子的線性或支鏈、飽和或者單不飽和或多不飽和的烴原子團,r3彼此獨立地選自-ch3、-ch2ch3、-ch2ch
2-ch3、-ch(ch3)2,但優選代表-ch3,并且x和y彼此獨立地代表1至32的值,具有r3=-ch3以及對于x為15至32的值和對于y為0.5至1.5的值的非離子型表面活性劑是非常特別優選的。
[0073]
可以優選使用的進一步的非離子型表面活性劑是式r1o[ch2ch(r3)o]
x
[ch2]kch(oh)[ch2]jor2的封端的聚(氧烷基化)非離子型表面活性劑,其中r1和r2代表具有1至30個碳
原子的線性或支鏈、飽和或不飽和、脂族或芳族烴原子團,r3代表h或甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、2-丁基或2-甲基-2-丁基原子團,x代表1至30的值,并且k和j代表1至12,優選1至5的值。如果值x≥2,則上式r1o[ch2ch(r3)o]
x
[ch2]kch(oh)[ch2]jor2中的每一個r3可以是不同的。r1和r2優選為具有6至22個碳原子的線性或支鏈、飽和或不飽和、脂族或芳族烴原子團,其中具有8至18個c原子的原子團是特別優選的。對于原子團r3,h、-ch3或-ch2ch3是特別優選的。對于x特別優選的值在1至20,特別是6至15的范圍內。
[0074]
如上所述,如果x≥2,則上式中的每一個r3可以是不同的。以這種方式,方括號中的環氧烷單元可以變化。例如,如果x代表3,則可以選擇原子團r3以便形成環氧乙烷(r
3=
h)或環氧丙烷(r3=ch3)單元,其可以以任何順序連接在一起,例如(eo)(po)(eo)、(eo)(eo)(po)、(eo)(eo)(eo)、(po)(eo)(po)、(po)(po)(eo)和(po)(po)(po)。此處作為實例對于x已選擇了值3,并且當然可以是更大的,其中變動范圍隨著x的值增加而增加,并且包括例如與少量(po)基團組合的大量(eo)基團,或反之亦然。
[0075]
上式的特別優選的封端的聚(氧烷基化)醇具有k=1和j=1的值,并且因此前式簡化為r1o[ch2ch(r3)o]
x ch2ch(oh)ch2or2。在上式中,r1、r2和r3如上文定義的,并且x代表從1到30,優選從1到20,且特別是從6到18的數目。其中原子團r1和r2具有9至14個c原子,r3代表h,且x采取從6到15的值的表面活性劑是特別優選的。
[0076]
最后,通式r
1-ch(oh)ch2o-(ao)
w-r2的非離子型表面活性劑已證明是特別有效的,其中r1代表直鏈或支鏈、飽和或者單不飽和或多不飽和的c
6-24-烷基或烯基原子團;r2代表具有2至26個碳原子的線性或支鏈烴原子團;a代表來自基團-ch2ch2、-ch2ch
2-ch2、-ch
2-ch(ch3)的原子團,并且w代表1至120,優選10至80,特別是20至40的值。這些非離子型表面活性劑的組包括例如c
4-22
脂肪醇-(eo)
10-80-2-羥基烷基醚,還特別是c
8-12
脂肪醇-(eo)
22-2-羥基癸基醚和c
4-22
脂肪醇-(eo)
40-80-2-羥基烷基醚。
[0077]
優選的清潔劑的特征在于該清潔劑含有至少一種非離子型表面活性劑,優選來自羥基混合醚組的非離子型表面活性劑,相對于清潔劑的總重量,所述非離子型表面活性劑按重量計的比例優選為0.2至10wt.%,更優選為0.4至7.0wt.%,且特別是0.6至6.0wt.%。
[0078]
除上述非離子型表面活性劑之外,用于自動餐具洗滌方法中的根據本發明的優選清潔劑還含有進一步的表面活性劑,特別是兩性表面活性劑。然而,相對于這些清潔劑的總重量,陰離子型表面活性劑的比例優選是有限的。因此,優選的自動餐具清洗劑的特征在于它們含有基于其總重量小于5.0wt.%,優選小于3.0wt.%,特別優選小于2.0wt.%的陰離子型表面活性劑。特別地為了避免過度發泡,并不使用更大數量的陰離子型表面活性劑。
[0079]
根據本發明的清潔劑的另一種優選組分是絡合劑。特別優選的絡合劑是膦酸鹽,條件是它們的使用是法規允許的。除1-羥基乙烷-1,1-二膦酸之外,絡合膦酸鹽還包括許多不同的化合物,例如二亞乙基三胺五(亞甲基膦酸)(dtpmp)。在該應用中特別優選羥基烷烴或氨基烷烴膦酸鹽。在羥基烷烴膦酸鹽中,1-羥基乙烷-1,1-二膦酸鹽(hedp)作為共助劑具有特別的重要性。它優選作為鈉鹽使用,二鈉鹽以中性方式反應,而四鈉鹽以堿性方式(ph 9)反應??赡艿陌被闊N膦酸鹽優選包括乙二胺四亞甲基膦酸鹽(edtmp)、二亞乙基三胺五亞甲基膦酸鹽(dtpmp)及其更高級的同系物。它們優選以中性反應性鈉鹽的形式使用,例如作為edtmp的六鈉鹽或作為dtpmp的七鈉鹽和八鈉鹽。在膦酸鹽的類別中,hedp優選用作助洗劑。氨基烷烴膦酸鹽另外具有顯著的重金屬結合能力。相應地,特別是如果試劑還含有漂
白劑,則可能優選使用氨基烷烴膦酸鹽,特別是dtpmp,或使用所提到的膦酸鹽的混合物。
[0080]
在本技術的上下文中的優選試劑含有來自以下組的一種或多種膦酸鹽:氨基三亞甲基膦酸(atmp)和/或其鹽;乙二胺四(亞甲基膦酸)(edtmp)和/或其鹽;二亞乙基三胺五(亞甲基膦酸)(dtpmp)和/或其鹽;1-羥基乙烷-1,1-二膦酸(hedp)和/或其鹽;2-膦酸丁烷-1,2,4-三羧酸(pbtc)和/或其鹽;六亞甲基二胺四(亞甲基膦酸)(hdtmp)和/或其鹽;次氮基三(亞甲基膦酸)(ntmp)和/或其鹽。
[0081]
特別優選的清潔劑是含有1-羥基乙烷-1,1-二膦酸(hedp)或二亞乙基三胺五(亞甲基膦酸)(dtpmp)作為膦酸鹽的那些清潔劑。當然,根據本發明的介質可以含有兩種或更多種不同的膦酸鹽。根據本發明優選的清潔劑的特征在于,所述清潔劑含有來自膦酸鹽組,優選1-羥基乙烷-1,1-二膦酸鹽的至少一種絡合劑,其中相對于清潔劑的總重量,膦酸鹽按重量的比例優選為0.1至8.0wt.%,更優選為0.2至5.0wt.%,且特別是0.5至3.0wt.%。
[0082]
根據本發明的試劑還優選含有助洗劑。助洗劑特別包括硅酸鹽和碳酸鹽。
[0083]
聚羧酸鹽/聚羧酸、聚合聚羧酸鹽、天冬氨酸、聚縮醛、糊精、其它有機共助劑和膦酸鹽作為有機共助劑特別值得一提。這些類別的物質在下文進行描述。需要時,這種有機共助劑物質可以以至多40wt.%,特別是至多25wt.%,且優選1wt.%至8wt.%的量包含。
[0084]
可以使用的有機助洗劑是可以以游離酸和/或其鈉鹽的形式使用的聚羧酸,例如,其中聚羧酸應理解為意指攜帶多于一個酸官能團的那些羧酸。例如,這些是檸檬酸,己二酸,琥珀酸,戊二酸,蘋果酸,酒石酸,馬來酸,富馬酸,糖二酸,羧甲基菊粉,單體和聚合氨基聚羧酸特別是甘氨酸二乙酸、甲基甘氨酸二乙酸、次氮基三乙酸(nta),亞氨基二琥珀酸酯例如乙二胺-n,n'-二琥珀酸和羥基亞氨基二琥珀酸酯,乙二胺四乙酸和聚天冬氨酸,聚膦酸特別是氨基三(亞甲基膦酸)、乙二胺四(亞甲基膦酸)、賴氨酸四(亞甲基膦酸)和1-羥基乙烷-1,1-二膦酸,聚合羥基化合物如糊精,以及聚合(聚)羧酸,特別是通過使多糖、聚合丙烯酸、甲基丙烯酸、馬來酸及其混合聚合物氧化而獲得的聚羧酸鹽,其還可能含有在聚合物中聚合的不含羧酸功能性的小部分的可聚合物質。需要時,這種有機助洗劑物質可以以至多50wt.%,特別是至多25wt.%,且優選10wt.%至20wt.%的量包含。
[0085]
除其助洗劑效果之外,游離酸通常還具有作為酸化組分的性質,并且因此也用于設置清潔劑的較低和較溫和的ph。此處特別值得一提的是檸檬酸、琥珀酸、戊二酸、己二酸、葡糖酸及其任何混合物。檸檬酸或檸檬酸的鹽特別優選用作助洗劑。進一步特別優選的助洗劑物質選自甲基甘氨酸二乙酸(mgda)、谷氨酸二乙酸酯(glda)、天冬氨酸二乙酸酯(asda)、羥乙基亞氨基二乙酸酯(heida)、亞氨基二琥珀酸酯(ids)和乙二胺二琥珀酸酯(edds)、羧甲基菊粉和聚天冬氨酸鹽。
[0086]
在優選的實施方案中,檸檬酸和/或檸檬酸鹽用作水溶性有機助洗劑。特別優選使用5至25wt.%,優選7.5至12.5wt.%的檸檬酸和/或5至25wt.%,優選7.5至12.5wt.%的檸檬酸鹽,優選堿金屬檸檬酸鹽,更優選檸檬酸鈉。檸檬酸/檸檬酸鹽可以各自以其水合物的形式使用,例如檸檬酸可以以一水合物的形式使用,而檸檬酸鹽可以以檸檬酸三鈉二水合物的形式使用。
[0087]
聚合聚羧酸鹽也適合作為助洗劑。這些是例如聚丙烯酸或聚甲基丙烯酸的堿金屬鹽,例如具有500至70,000g/摩爾的相對分子質量的那些堿金屬鹽。在本文件的上下文中,對于聚合聚羧酸鹽給出的摩爾質量是特定酸形式的重均摩爾質量mw,其原則上已使用凝膠
滲透色譜法(gpc)進行確定,其中已使用uv檢測器。測量針對外部聚丙烯酸標準進行,由于其與測試聚合物的結構關系,所述外部聚丙烯酸標準產生了實際的分子量值。這些規格顯著不同于對于其使用聚苯乙烯磺酸作為標準的分子量規格。針對聚苯乙烯磺酸測量的摩爾質量一般顯著高于本文件中指定的摩爾質量。
[0088]
合適的聚合物特別是聚丙烯酸酯,其優選具有2,000至20,000g/摩爾的分子質量。由于其優異的溶解性,來自該組的摩爾質量為2,000至10,000g/摩爾,且特別優選3,000至5,000g/摩爾的短鏈聚丙烯酸酯依次又可以是優選的。
[0089]
另外,共聚聚羧酸鹽是合適的,特別是丙烯酸與甲基丙烯酸的那些以及丙烯酸或甲基丙烯酸與馬來酸的那些。已發現含有50wt.%至90wt.%丙烯酸和50wt.%至10wt.%馬來酸的丙烯酸與馬來酸的共聚物是特別合適的?;谟坞x酸,其相對分子質量一般為2,000至70,000g/摩爾,優選為20,000至50,000g/摩爾,且特別是30,000至40,000g/摩爾。
[0090]
除先前描述的助洗劑之外,具有清潔作用的聚合物也可以包含在清潔劑中。相對于根據本發明的清潔劑的總重量,聚合物按重量計的比例優選為0.1至20wt.%,更優選為1.0至15wt.%,且特別是2.0至12wt.%。
[0091]
特別是來自共聚聚磺酸鹽組的含有磺酸基的聚合物,優選用作具有清潔作用的聚合物。除含有磺酸基的單體之外,這些共聚聚磺酸鹽還含有來自不飽和羧酸組的至少一種單體。
[0092]
作為不飽和羧酸,特別優選使用式r1(r2)c=c(r3)cooh的不飽和羧酸,其中r1至r3彼此獨立地代表-h、-ch3、具有2至12個碳原子的直鏈或支鏈的飽和烷基原子團、具有2至12個碳原子的直鏈或支鏈的單不飽和或多不飽和的烯基原子團、-nh2、-oh或-cooh-取代的如上定義的烷基或烯基原子團,或者代表-cooh或-coor4,其中r4是具有1至12個碳原子的飽和或不飽和、直鏈或支鏈的烴原子團。特別優選的不飽和羧酸是丙烯酸、甲基丙烯酸、乙基丙烯酸、α-氯丙烯酸、α-氰基丙烯酸、巴豆酸、α-苯基丙烯酸、馬來酸、馬來酸酐、富馬酸、衣康酸、檸康酸、亞甲基丙二酸、山梨酸、肉桂酸或其混合物。當然也可以使用不飽和二羧酸。
[0093]
對于含磺酸基的單體,式r5(r6)c=c(r7)-x-so3h的那些單體是優選的,其中r5至r7彼此獨立地代表-h、-ch3、具有2至12個碳原子的直鏈或支鏈的飽和烷基原子團、具有2至12個碳原子的直鏈或支鏈的單不飽和或多不飽和的烯基原子團、-nh2、-oh或-cooh-取代的烷基或烯基原子團,或者代表-cooh或-coor4,其中r4是具有1至12個碳原子的飽和或不飽和、直鏈或支鏈的烴原子團,并且x代表任選存在的間隔基團,其選自其中n=0至4的-(ch2)
n-、其中k=1至6的-coo-(ch2)
k-、-c(o)-nh-c(ch3)
2-、-c(o)-nh-c(ch3)
2-ch
2-和-c(o)-nh-ch(ch2ch3)-。
[0094]
在這些單體中,式h2c=ch-x-so3h、h2c=c(ch3)-x-so3h和ho3s-x-(r6)c=c(r7)-x-so3h的那些單體是優選的,其中r6和r7彼此獨立地選自-h、-ch3、-ch2ch3、-ch2ch2ch3和-ch(ch3)2,并且x代表任選存在的間隔基團,其選自其中n=0至4的-(ch2)
n-、其中k=1至6的-coo-(ch2)
k-、-c(o)-nh-c(ch3)
2-、-c(o)-nh-c(ch3)
2-ch
2-和-c(o)-nh-ch(ch2ch3)-。
[0095]
特別優選的含磺酸基的單體是1-丙烯酰胺-1-丙磺酸、2-丙烯酰胺-2-丙磺酸、2-丙烯酰胺-2-甲基-1-丙磺酸、2-甲基丙烯酰胺-2-甲基-1-丙磺酸、3-甲基丙烯酰胺-2-羥基-丙磺酸、烯丙基磺酸、甲代烯丙基磺酸、烯丙氧基苯磺酸、甲代烯丙氧基苯磺酸、2-羥基-3-(2-丙烯氧基)丙磺酸、2-甲基-2-丙烯-1-磺酸、苯乙烯磺酸、乙烯基磺酸、丙烯酸3-磺丙
酯、甲基丙烯酸3-磺丙酯、磺基甲基丙烯酰胺、磺甲基甲基丙烯酰胺、以及上述酸或其水溶性鹽的混合物。
[0096]
在聚合物中,磺酸基可以全部或部分以中和形式存在。部分或完全中和的含磺酸基的共聚物的使用根據本發明是優選的。根據本發明優選使用的磺基共聚物的摩爾質量可以變化,以便使聚合物的性質適應所需的預期用途。優選的自動餐具清洗劑的特征在于,所述共聚物具有2,000至200,000g/摩爾,優選4,000至25,000g/摩爾,且特別是5,000至15,000g/摩爾的摩爾質量。
[0097]
在另一個優選實施方案中,共聚物不僅包含含羧基的單體和含磺酸基的單體,而且包含至少一種非離子、優選疏水性單體。特別地,根據本發明的自動餐具清洗劑的漂洗性能能夠通過使用這些疏水改性的聚合物得到改善。
[0098]
含有共聚物的餐具清洗劑根據本發明是優選的,所述共聚物包含i)含有羧酸基團的單體,ii)含有磺酸基的單體,iii)非離子單體。通過使用這些三元共聚物,與含有磺基聚合物而不添加非離子單體的可比較的餐具清洗劑相比,已能夠改善根據本發明的自動餐具清洗劑的漂洗性能。
[0099]
作為非離子單體,優選使用通式r1(r2)c=c(r3)-x-r4的單體,其中r1至r3彼此獨立地代表-h、-ch3或-c2h5,x代表選自-ch
2-、-c(o)o-和-c(o)-nh-的任選存在的間隔基團,并且r4代表具有2至22個碳原子的直鏈或支鏈的飽和或不飽和的烷基原子團,優選具有6至22個碳原子的芳族原子團。特別優選的非離子單體是丁烯、異丁烯、戊烯、3-甲基丁烯、2-甲基丁烯、環戊烯、己烯、己烯-1,2-甲基戊烯-1、3-甲基戊烯-1、環己烯、甲基環戊烯、環庚烯、甲基環己烯、2,4,4-三甲基戊烯-1、2,4,4-三甲基戊烯-2,2,3-二甲基己烯-1、2,4-二甲基己烯-1、2,5-二甲基己烯-1、3,5-二甲基己烯-1、4,4-二甲基己烷-1、乙基環己烯、1-辛烯、具有10個或更多個碳原子的α-烯烴(例如1-癸烯、1-十二烯、1-十六烯、1-十八烯和c
22
α-烯烴)、2-苯乙烯、α-甲基苯乙烯、3-甲基苯乙烯、4-丙基苯乙烯、4-環己基苯乙烯、4-十二烷基苯乙烯、2-乙基-4-芐基苯乙烯、1-乙烯基萘、2-乙烯基萘、丙烯酸甲酯、丙烯酸乙酯、丙烯酸丙酯、丙烯酸丁酯、丙烯酸戊酯、丙烯酸己酯、甲基丙烯酸甲酯、n-(甲基)丙烯酰胺、丙烯酸-2-乙基己酯、甲基丙烯酸-2-乙基己酯、n-(2-乙基己基)丙烯酰胺、丙烯酸辛酯、甲基丙烯酸辛酯、n-(辛基)丙烯酰胺、丙烯酸月桂酯、甲基丙烯酸月桂酯、n-(月桂基)丙烯酰胺、丙烯酸十八酯、甲基丙烯酸十八酯、n-(硬脂酰)丙烯酰胺、山崳酰丙烯酸二十二烷酯、甲基丙烯酸二十二烷酯和n-(二十二烷基)丙烯酰胺或其混合物。
[0100]
相對于根據本發明的清潔劑的總重量,含磺酸基的共聚物按重量計的比例優選為0.1至15wt.%,更優選為1.0至12wt.%,且特別是2.0至10wt.%。
[0101]
根據本發明的清潔劑可以含有有機溶劑作為進一步的組分。添加有機溶劑對這些試劑的酶穩定性和清潔性能具有有利作用。優選的有機溶劑衍生自一元醇或多元醇、鏈烷醇胺或乙二醇醚。溶劑優選選自乙醇、正丙醇或異丙醇、丁醇、乙二醇、丙二醇或丁二醇、甘油、二甘醇、丙基二甘醇或丁基二甘醇、己二醇、乙二醇甲醚、乙二醇乙醚、乙二醇丙醚、乙二醇單正丁醚、二甘醇甲醚、二甘醇乙醚、丙二醇甲醚、丙二醇乙醚或丙二醇丙醚、二丙二醇甲醚或二丙二醇乙醚、甲氧基三甘醇、乙氧基三甘醇或丁氧基三甘醇、1-丁氧基乙氧基-2-丙醇、3-甲基-3-甲氧基丁醇、丙二醇叔丁基醚和這些溶劑的混合物。相對于根據本發明的清潔劑的總重量,這些有機溶劑按重量計的比例優選為0.1至10wt.%,更優選為0.2至
8.0wt.%,且特別是0.5至5.0wt.%。在穩定清潔劑方面特別有效的特別優選的有機溶劑是甘油以及1,2-丙二醇。含有優選地來自甘油和1,2-丙二醇組的至少一種多元醇的液體清潔劑根據本發明是優選的,其中相對于清潔劑的總重量,多元醇按重量計的比例優選為0.1至10wt.%,更優選為0.2至8.0wt.%,且特別是0.5至5.0wt.%。其它優選的有機溶劑是有機胺和鏈烷醇胺。根據本發明的清潔劑優選含有以0.1至10wt.%,更優選0.2至8.0wt.%,且特別是0.5至5.0wt.%的量的這些胺,在每種情況下基于其總重量。特別優選的鏈烷醇胺是乙醇胺。
[0102]
根據本發明的清潔劑的另一種優選組分是糖醇(alditol)。糖醇的組包括式hoch2[ch(oh)]nch2oh的非環狀多元醇。糖醇包括例如甘露糖醇、異麥芽糖醇、乳糖醇、山梨糖醇和木糖醇、蘇糖醇、赤蘚糖醇和阿拉伯糖醇。已發現山梨糖醇關于酶穩定性是特別有利的。相對于清潔劑的總重量,糖醇按重量計的比例優選為1.0至10wt.%,更優選為2.0至8.0wt.%,且特別是3.0至6.0wt.%。
[0103]
根據本發明的試劑有利地含有以2μg至20mg,優選5μg至17.5mg,更優選20μg至15mg,且最特別優選50μg至10mg/g試劑的量的蛋白酶。進一步地,包含在試劑中的蛋白酶和/或試劑的其它成分可以用這樣的物質進行包被,所述物質在室溫或水的不存在下對酶是不可滲透的,并且在試劑的使用條件下變得對酶可滲透。因此,本發明的此類實施方案的特征在于,所述蛋白酶由在室溫或水的不存在下對酶是不可滲透的物質進行包被。此外,清潔劑本身可以包裝在容器優選透氣的容器中,所述清潔劑在使用前不久或在洗滌過程期間從所述容器中釋放出來。
[0104]
本發明的這些實施方案包括根據本發明的試劑的所有固體、粉末、顆粒、片劑形式、液體、凝膠或糊狀施用形式,其也可以任選地由多個相組成,并且可以以壓縮形式或未壓縮形式存在。試劑可以作為可流動的粉末存在,特別地具有300g/l至1200g/l,特別是500g/l至900g/l或600g/l至850g/l的堆密度。試劑的固體劑型還包括含有固體試劑的擠出物、顆粒、片劑或小袋,其既可以存在于大容器中,也可以按份存在??商娲?,試劑也可以采取液體、凝膠或糊狀形式,例如非水性液體清洗劑或非水性糊狀物的形式、或者水性液體清洗劑或含水糊狀物的形式。試劑也可以作為單組分系統存在。此類試劑由一個相組成??商娲?,試劑也可以由多個相組成(多組分系統)。相應地,此類試劑被分成幾種組分,例如兩個液相、兩個固相或一個液相和一個固相?;谒?或有機溶劑的液體產品形式可以以增稠的形式,即以凝膠的形式存在。
[0105]
如果物質(例如組合物)或試劑在25℃和1,013毫巴下處于固體物理狀態,則它是根據本發明的定義的固體。
[0106]
如果物質(例如組合物)或試劑在25℃和1,013毫巴下處于流體物理狀態,則它是根據本發明的定義的液體。液體還包括凝膠形式。
[0107]
如果根據本發明的清潔劑以液體形式存在,則它們優選含有基于其總重量的40wt.%,優選50至90wt.%,且特別是60至80wt.%的水。
[0108]
本文所述的清潔劑,特別是餐具清洗劑,甚至更優選自動餐具清洗劑,優選預包裝成計量單位。這些計量單位優選包含對于清潔循環所需的活性清潔物質的量。優選的計量單位具有12至30g,優選14至26g,且特別是15至22g的重量。特別優選這樣選擇上述計量單位的體積及其空間形狀,使得預包裝的單位可以經由洗碗機的投配室進行投配。因此,計量
單位的體積優選為10至35ml,優選為12至30ml。
[0109]
自動餐具清洗劑,特別是預制的計量單位,特別優選具有水溶性包裹物。水溶性包裹物優選由水溶性薄膜材料制成,所述水溶性薄膜材料選自聚合物或聚合物混合物。包裹物可以由一層或者兩層或更多層水溶性薄膜材料制成。第一層和另外層(如果存在的話)的水溶性薄膜材料可以是相同或不同的。特別優選的是這樣的薄膜,其例如可以在它們已充滿試劑后進行膠粘和/或密封,以形成包裝例如管或小袋。
[0110]
水溶性包裝可以具有一個或多個腔室。試劑可以包含在水溶性包裹物的一個或多個腔室(如果存在的話)中。試劑的量優選對應于餐具洗滌周期所需的全部或一半劑量。
[0111]
水溶性包裹物優選含有聚乙烯醇或聚乙烯醇共聚物。含有聚乙烯醇或聚乙烯醇共聚物的水溶性包裹物顯示出良好的穩定性,伴隨足夠高水平的水溶性,特別是冷水溶解性。用于生產水溶性包裹物的合適的水溶性薄膜優選基于聚乙烯醇或聚乙烯醇共聚物,其分子量在5,000至1,000,000g/摩爾,優選20,000至500,000g/摩爾,特別優選30,000至100,000g/摩爾,且特別是40,000至80,000g/摩爾的范圍內。用于根據本發明的水溶性包裝的水溶性包裹物中的合適的水溶性薄膜是由monosol llc例如以名稱m8630、c8400或m8900銷售的薄膜。其它合適的薄膜包括來自aicello chemical europe gmbh的以名稱pt、ga、kc或kl的薄膜,或者來自kuraray的vf-hp薄膜。
[0112]
此類水溶性包裹物也已經在專利申請wo2004031338a和wo2003099985a中進行描述,所述專利申請的公開內容在此整體引入作為參考。
[0113]
酶一般不以純蛋白質的形式提供,而是以穩定、可貯存和可轉運的制劑形式提供。這些預包裝的制劑包括例如通過造粒、擠出或凍干獲得的固體制劑,或者,特別是在液體或凝膠劑的情況下,酶的溶液,其有利地是最大限度地濃縮的,具有低含水量和/或補充有穩定劑或其它助劑。此外,能夠將兩種或更多種酶配制在一起,使得單個顆粒顯示出多種酶活性。
[0114]
根據本發明的清潔劑可以專一地含有如本文定義的吉氏芽孢桿菌蛋白酶??商娲?,它們也可以含有其它酶,其濃度對于試劑的有效性是有利的。因此,本發明的一個進一步實施方案由進一步包含一種或多種進一步的酶的試劑代表??梢詢炦x使用的進一步的酶是可以在根據本發明的試劑中顯示出催化活性的所有酶,特別是脂肪酶、淀粉酶、纖維素酶、半纖維素酶、甘露聚糖酶、鞣酸酶、木聚糖酶、黃原膠酶、木葡聚糖酶、β-葡糖苷酶、果膠酶、卡拉膠酶、過水解酶、氧化酶、氧化還原酶或不同于根據本發明的蛋白酶的另一種蛋白酶、以及其混合物?;诨钚缘鞍踪|,酶在每種情況下有利地以1x 10-8
至5wt.%的量包含在試劑中。越來越優選地,基于活性蛋白質,每種進一步的酶以1x 10-7
至3wt.%、0.00001至1wt.%、0.00005至0.5wt.%、0.0001至0.1wt.%,并且特別優選0.0001至0.05wt.%的量包含在根據本發明的試劑中。特別優選地,酶顯示出對特定污漬或斑點的協同清潔性能,即在試劑組合物中包含的酶在其清潔性能方面相互支持。非常特別優選地,在根據本發明包含的蛋白酶和根據本發明的試劑的進一步的酶之間,特別包括在所述蛋白酶和淀粉酶和/或脂肪酶之間存在此類協同作用。協同效應不僅可以在不同酶之間出現,而且還可以在一種或多種酶與根據本發明的試劑的其它成分之間出現。
[0115]
蛋白酶的實例是來自解淀粉芽孢桿菌(bacillus amyloliquefaciens)的枯草桿菌蛋白酶bpn'和來自地衣芽孢桿菌(bacillus licheniformis)的carlsberg、蛋白酶pb92、
枯草桿菌蛋白酶147和309、來自遲緩芽孢桿菌(bacillus lentus)的蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶dy,以及熱敏酶、蛋白酶k以及蛋白酶tw3和tw7,其屬于枯草桿菌酶,但不再屬于狹義的枯草桿菌蛋白酶??莶輻U菌蛋白酶carlsberg可以商品名從novozymes公司以進一步開發的形式獲得??莶輻U菌蛋白酶147和309分別以商品名和由novozymes公司銷售。以名稱上市的蛋白酶變體衍生自來自遲緩芽孢桿菌dsm 5483的蛋白酶。進一步可用的蛋白酶是例如可從novozymes公司以商品名和獲得的酶,其以商品名和由danisco/genencor公司銷售,其以商品名由advanced biochemicals ltd.公司銷售,其以商品名由wuxi snyder bioproducts ltd.公司銷售,其以商品名和由amano pharmaceuticals ltd.公司銷售,并且以名稱蛋白酶k-16由kao corp銷售。特別優選使用國際專利申請wo2008086916和wo2007131656中公開的來自吉氏芽孢桿菌和短小芽孢桿菌(bacillus pumilus)的蛋白酶。進一步有利地可用的蛋白酶公開于專利申請wo9102792、wo2008007319、wo9318140、wo0144452、gb1243784、wo9634946、wo2002029024和wo2003057246中??梢允褂玫倪M一步的蛋白酶是天然存在于微生物嗜麥芽窄食單胞菌(stenotrophomonas maltophilia)特別是嗜麥芽窄食單胞菌k279a、中間芽孢桿菌(bacillus intermedius)和球形芽孢桿菌(bacillus sphaericus)中的那些蛋白酶。
[0116]
淀粉酶的實例是來自地衣芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌或嗜熱脂肪芽孢桿菌(bacillus stearothermophilus)的α-淀粉酶,以及特別地其已對于在清潔劑中的使用進行改善的開發。來自地衣芽孢桿菌的酶可從novozymes以名稱以及從danisco/genencor以名稱st獲得。這種α-淀粉酶的開發產品可從novozymes以商品名和ultra,從danisco/genencor以名稱oxam,以及從daiwa seiko inc.,tokyo,日本作為獲得。來自解淀粉芽孢桿菌的α-淀粉酶通過novozymes以名稱上市,并且來自嗜熱脂肪芽孢桿菌的α-淀粉酶的衍生變體也通過novozymes以名稱和上市。此外,為此目的,應該強調的是來自芽孢桿菌屬物種a 7-7(dsm 12368)的α-淀粉酶和來自bacillus agaradherens(dsm 9948)的環糊精葡萄糖基轉移酶(cgtase)。此外,可以使用在國際專利申請wo2003002711、wo2003054177和wo2007079938中公開的淀粉分解酶,所述國際專利申請的公開內容因此明確地提及或者其公開內容因此明確地包括在本專利申請中。還可以使用所有提到的分子的融合產物。此外,可從novozymes以商品名獲得的來自黑曲霉(aspergillus niger)和米曲霉(a.oryzae)的α-淀粉酶的開發是合適的??梢杂欣厥褂玫钠渌虡I產品是例如同樣來自novozymes的以及或stainzyme或stainzyme以及amplify
tm
或amplify prime
tm
。根據本發明還可以使用可以通過點突變獲得的這些酶的變體。
[0117]
特別是由于其甘油三酯切割活性而使用,而且也為了從合適的前體原位生成過酸的脂肪酶或角質酶的實例,包括例如最初得自柔毛腐質霉(humicola lanuginosa)(疏棉狀嗜熱絲孢菌(thermomyces lanuginosus))的脂肪酶或由其進一步開發,特別是在所提到的
位置中具有從脂肪酶起始的下述氨基酸交換中的一種或多種的那些脂肪酶:d96l、t213r和/或n233r,特別優選t213r和n233r。脂肪酶例如由novozymes公司以商品名ultra、和銷售??梢杂欣厥褂玫牧硪环N脂肪酶可從novozymes以商品名獲得。此外,例如,也可以使用最初從茄病鐮刀菌(fusarium solani pisi)和特異腐質霉(humicola insolens)中分離的角質酶。還可以使用的脂肪酶可從amano以名稱lipase和lipaselipasebacillus sp.lipaselipase和lipase獲得。例如,可以使用來自danisco/genencor公司的脂肪酶或角質酶,其起始酶最初從門多薩假單胞菌(pseudomonas mendocina)和茄病鐮刀菌(fusarium solanii)中分離。作為其它重要的商業產品,應該提到最初由gist-brocades(現為danisco/genencor)上市的制劑m1和由meito sangyo kk以名稱lipaselipase和lipase上市的酶,以及來自genencor的產品
[0118]
為了增加漂白效果,根據本發明可以使用氧化還原酶例如氧化酶、加氧酶、過氧化氫酶、過氧化物酶(例如鹵-、氯-、溴-、木質素、葡萄糖或錳過氧化物酶)、雙加氧酶或漆酶(酚氧化酶、多酚氧化酶)。有利地,另外添加與酶相互作用的有機化合物,特別優選芳族化合物,以便增強有關氧化還原酶(增強劑)的活性,或者在極大不同的氧化還原電位的情況下,確保氧化酶和污漬(介質)之間的電子流動。
[0119]
本發明的一個進一步目的是用于清潔硬表面,特別是餐具的方法,其特征在于在至少一個方法步驟中,使用根據本發明的試劑。
[0120]
優選的清潔方法是自動餐具洗滌方法。在此類方法中,例如借助于門中的分配室或借助于洗碗機的內部的附加分配容器,可以將根據本發明的清潔劑分配到清潔液內??商娲?,清潔劑也可以直接應用于臟餐具或洗碗機的內壁之一,例如門的內側。根據本發明的方法在商購可得的洗碗機的內部進行。在洗碗機的情況下,清潔程序一般可以在進行餐具洗滌方法之前由用戶選擇且確定。在根據本發明的方法中使用的洗碗機清潔程序包括至少一個預洗循環和一個清潔循環。包括進一步的清潔或漂清循環例如漂洗循環的清潔程序根據本發明是優選的。根據本發明的方法特別優選是包括預洗循環、清潔循環和漂洗循環的清潔程序的部分。根據本發明的方法優選與清潔程序結合使用,在所述清潔程序中,洗滌液在清潔循環期間被加熱。在根據本發明的方法的一個優選實施方案中,根據本發明的清潔劑在其期間分配到洗碗機的內部的清潔循環的特征在于,在所述循環期間清潔液的溫度上升到高于30℃,優選高于40℃,且特別是高于50℃的值。
[0121]
在各個實施方案中,上述方法的特征在于所述蛋白酶在0至100℃,優選10至70℃,更優選30至50℃,且最優選45℃的溫度下使用。
[0122]
對于根據本發明的蛋白酶和含有其的試劑描述的所有方面、目的和實施方案也適用于本發明的主題、相應的方法和用途。因此,在這一點上在適當的點上明確參考本公開內容,其中應注意本公開內容也適用于根據本發明的上述用途。
實施例
[0123]
根據本發明的餐具清洗劑的清潔性能的確定
[0124]
測試了以餐具清洗劑片劑形式的商業自動餐具清洗劑的清潔性能,所述餐具清洗劑片劑含有作為過氧化氫源(漂白劑)的15wt.%過碳酸鈉、作為漂白催化劑的0.03wt.%mn-me-tacn(mn-tacn)、以及作為漂白活化劑的2.2wt.%taed,在每種情況下向其中加入蛋白酶顆粒1或2。蛋白酶各自與相同的活性蛋白質一起使用。
[0125]
在miele gsl洗碗機(程序:45℃,水硬度21
°
dh)中,依照ikw方法確定清潔性能。在清潔程序起始之前,將餐具清洗劑片劑放入計量裝置中。在每種情況下進行三次測定,在每種情況下對其結果取平均值。根據從1到10的等級,目視評估清潔性能,其中值10是最佳評級(沒有可辨別的殘留物)。如果改善為至少1.0,則值被視為顯著的。結果顯示于下表中。
[0126]
表1:
[0127][0128]
表2:
[0129][0130]
表3:
[0131][0132][0133]
蛋白酶顆粒1含有根據wo2017215925中描述的seq id no:5的蛋白酶。
[0134]
蛋白酶顆粒2含有比率為1.5:1的蛋白酶2a(根據來自wo2016000973的seq id no:6的蛋白酶)和蛋白酶2b(來自novozymes)的組合。
[0135]
令人驚訝地,已發現了當使用蛋白酶顆粒1時,除對含蛋白質污漬的顯著改善的清潔性能之外,還可以觀察到對茶漬的顯著改善的清潔性能。
再多了解一些
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